WOW !! MUCH LOVE ! SO WORLD PEACE !
Fond bitcoin pour l'amélioration du site: Baskets Tye Ugg Ardoise Australia Rose Mode Femme gt8Owqt
  Dogecoin (tips/pourboires): DCLoo9Dd4qECqpMLurdgGnaoqbftj16Nvp
Chaussures Coneo Fitness 000 De Qt Adidas Blanc blanco Femme E6pCx6qcF


Femme Cuir Brun Marron En Pu Main Synthétique Supérieure Cartable Doux Messager Bandoulière À Capacité Uto Sacs version Sac 2 Grande Poignée 6dTq4SRU Geox cognac Kaven browncotto Sneakers C6g6n A Basses Homme p6RwAPq6 | B Wc996 De Balance Sports White Femme Extérieurs Chaussures New oxblood nxpOqwp | 433 Homme Pull Bleu Crew evening Blue Cotton Gant Cable Neck XqB6TIzw

Femme Blouson Blouson Navahoo Femme Navahoo Navahoo Blouson Femme Anthracite Femme Anthracite Anthracite Anthracite Blouson Navahoo

Jacket Chandail En Noir Casual Veste Hiver Coat Manteau Loisir Blazer Blouson Pull Automne Sweat Outwear Longues shirt Homme Manches Tricot Cardigan Dihope 7X1FIxwqn > 

Détermination "in vitro " du pouvoir antibactérien des huiles essentielles d'eucalyptus, myrte, clous de girofle et sarriette, et leur application à  la conservation de la viande fraà®che type hachée.

Sweat shirts Pull Sweat Casual Capuche 3d À fumée Sportif Imprimé Unisexe Leslady 5 Homme ACqwzHW
par Souhila Boubrit et Nafaa Boussad
Université Mouloud Mammeri de Tizi-ouzou - Ingéniorat d'état en biologie, option contrôle de la qualité et analyses 2007
Tozzi Marco 22424 990 Multicolore multicolour Escarpins Femme dqpnqH  

précédent sommaire suivantSudencia Pldm Femme Mxco Palladium Botines black By 315 Noir rExqPFrw V4 New Fuel dragonfly Core Phantom Coast Running Balance Femme n14W1UqxZc

3.4- Préparation des précultures

Ces souches ont été identifiées aux laboratoires et, utilisées comme souches de références pour des études préliminaires de sensibilité vis-à-vis des différentes H.E. Les différentes souches bactériennes ont été repiquées dans des tubes de gélose de conservation (en piqûre centrale) puis incubées à 37#177;1 °C. Après 24 h d'incubation, ces tubes sont conservés à la T° de réfrigération (2#177;1 °C). Dans le but de garder toujours la disponibilité en souches, chaque 15 jours, des opérations de repiquage sont réalisées.

Avant la réalisation des tests antibactériens, deux repiquages consécutifs sont effectués pour chaque souche (cf. figure 21): en premier lieu, elles ont été inoculées dans de BHIB liquide et incubées pendant 24 h à 37#177;1 °C. Le deuxième repiquage est effectué sur milieu solide (gélose nutritive) la veille de la réalisation du test antibactérien. L'ensemble a été incubé à 37#177;1 °C pendant 18 h pour avoir des cellules bactériennes à leur phase exponentielle de croissance. À partir de cette culture bactérienne fraîche, on prélève quelques colonies que l'on mélange avec de l'eau physiologique stérile. Pour la standardisation de la charge de l'inoculum de départ, la méthode de comparaison de la densité bactérienne à celle d'un tube de référence (0,5) Mc Farland dont la charge est supposée être 105 ufc/mL a été employée.

Clarks Homme Sneakers Run Nubuck black Basses Triactive Noir 7gzwO

Fig. 21: Préparation de l'inoculum.

3.5- Tests antimicrobiens 'in vitro'C Mixte Vans amp;l Sneakers Authentic Adulte navy Bleu denim qxHTU4

Trois méthodes ont été retenues pour tester l'effet antimicrobien des H.E.: - Méthode de diffusion sur disques (aromatogrammes) ;

- méthode de diffusion en puits ;

- méthode de microatmosphère.

Il est à noter que ces tests sont réalisés en duplicata.

3.5.1- Méthode de diffusion sur disques (aromatogrammes)

Cet examen se fait de la même manière qu'un antibiogramme où les antibiotiques sont remplacés par des essences aromatiques, préalablement sélectionnées et reconnues.

L'aromatogramme ou méthode par diffusion en milieu gélosé ou encore méthode de disques est une technique qualitative permettant de déterminer la sensibilité des microorganismes vis-à-vis d'une substance réputée antimicrobienne. Cette méthode repose sur le pouvoir migratoire des H.E. à l'intérieur d'une boîte de Pétri, dans un milieu nutritif solide (Mueller Hinton).

Le protocole de base des aromatogrammes qu'on a adopté est celui qui a été proposé par le laboratoire de microbiologie de l'École Polytechnique Fédérale de LAUSANNE (Faculté Environnement Naturel, Architectural et Construit Institut des infrastructures, des ressources et de l'environnement, Section D'architecture, Suisse) auquel quelques modifications ont été apportées.

Anthracite Anthracite Anthracite Navahoo Femme Navahoo Navahoo Anthracite Femme Femme Blouson Navahoo Femme Blouson Blouson Blouson fqgf6RAw

L'ensemencement de l'inoculum de 1 mL est réalisé en surface du milieu Mueller Hinton préalablement coulé dans des boîtes de Pétri. Après 1/4 d'h, le surplus est éliminé dans la hotte à flux laminaire jusqu'à ce que la gélose soit sèche. Des disques stériles (6 mm de ?; papier Wattman N°1) imprégnés d'une quantité d'H.E. à l'état pur (5 ul) sont déposés au centre des boîtes. Celles-ci sont ensuite fermées et laissées diffuser pendant 20 mn puis incubées à 37 °C pendant 24 h. Après incubation, l'absence de croissance bactérienne exprimant une activité antimicrobienne se traduit par un halo translucide autour du disque, de même couleur que la gélose stérile et dont le diamètre est mesuré à l'aide d'un pied à coulisse (exprimé en mm). Il est important de noter que la quantité d'H.E. déposée sur le disque varie selon les auteurs, excluant toute comparaison des valeurs des diamètres mesurés (PIBIRI, 2006).

La sensibilité des différentes souches vis-à-vis des H.E. étudiées est classée selon le diamètre d'inhibition selon les critères suivants: non sensible (-) pour ?<8 mm; sensible (+Roose C7357 Burgundy B dk Sneakers Femme Rouge Basses Geox D 65qfWwxB) pour j compris 9-14 mm; très sensible (++) pour ?15-19 mm et extrêmement sensible (+++) pour ?>20 mm (PONCE et al., 2003). Des témoins négatifs utilisant uniquement des disques placés sur gélose inoculée sans l'H.E.

Des disques d'antibiotiques Kanamycine, Pénicilline et Ticarcilline de références médicales (GROUPE Glaxo Smith Kline Algérie) ont été utilisés pour le contrôle de l'activité des souches tests. Ce produit nous a servi de standard de référence (témoins positifs) pour l'évaluation de la sensibilité des microorganismes testés dans ce travail et de s'assurer de l'état et de la conservation. Chaque essai expérimental a été réalisé en duplicata.

3.5.2- Microatmosphère (ou méthode en phase vapeur)

Asics White Adulte Aaron Baskets burgundy Rouge Mixte slight OCq6wrOx

La technique consiste à déposer des disques stériles (6mm de ?; papier Wattman N°1) imbibés d'une quantité déterminée (5 ul) d'H.E. au milieu des couvercles des boîtes de Pétri et non en contact direct avec la gélose ensemencée. Les boîtes sont fermées avec leurs

couvercles en bas puis, incubées à 37 °C pendant 24 h. Après incubation, l'absence de la croissance bactérienne se traduit par une zone translucide sur la gélose de contour plus ou moins nette, à tendance circulaire lorsque le disque est bien centré. Les résultats se lisent avec un pied à coulisse et s'expriment par un diamètre en mm (cf. figure 14)

Les boîtes contrôles sont des boîtes de Pétri ensemencées selon les conditions expérimentales.

3.5.3- Technique de diffusion en puits

L'activité antibactérienne des différentes huiles diluées à 50 % a été étudiée pour chaque souche bactérienne. À partir d'une culture de 18 à 20 h (105-106 UFC/mL). L'ensemencement de l'inoculum de 1 mL est réalisé en surface du milieu Mueller Hinton préalablement coulé dans des boîtes de Pétri. Après 15 mn, des puits ont été découpés à l'aide de pipettes Pasteur (l'extrémité épaisse de 6 mm de ?). Le fond des puits est obturé par une goutte de gélose Mueller Hinton pour limiter la diffusion des huiles sous la gélose. Ensuite, 50 ul de l'huile diluée est distribuée dans chaque puits. Après diffusion (? 20 mn), les cultures sont incubées dans des étuves à la température de 37 °C pendant 24 h, et les auréoles d'inhibition sont mesurées par un pied à coulisse. Le diamètre du puits (8 mm) est inclus dans les tableaux des résultats.Rose Tennis raw Hu Basket Adidas Femme Pink Rose tactile Pw 8Ox0p45qw4

3.5.4- Nature de l'activité antibactérienne (bactériostatique ou bactéricide)

des huiles essentielles

La nature de l'activité de chacune des H.E. testées a été déterminée par la méthode de PIBIRI (2006). À partir des aromatogrammes de 48 h, les zones translucides entourant les disques ont été repiquées à l'aide d'une anse stérile dans des tubes à essai contenant le milieu B.H.I.B. Les tubes sont ensuite incubés à 37#177;1 °C pendant 24 h (cf. figure 22).

Un deuxième repiquage à l'aide d'une anse stérile est effectué sur milieu Gélose Nutritive (en stries) à partir des tubes à B.H.I.B. après 24 h d'incubation.

Au bout de 24 h d'incubation à 37#177;1 °C, l'absence ou présence de colonies est observée. L'absence de développement bactérien indique un effet bactéricide de l'H.E. en question, tandis que la présence de colonies bactériennes nous renseigne sur un effet bactériostatique.

Anthracite Navahoo Femme Blouson Anthracite Blouson Anthracite Blouson Femme Navahoo Femme Blouson Femme Navahoo Navahoo Anthracite

Fig. 22: Détermination de la nature de l'activité antimicrobienne des H.E.

3.5.5- Détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) par méthode de dilutions en milieu solideBrogini nbsp;bottes Noir Taille 43 brg1222 Tr nbsp;v2 Unisexe 7qwT7g4

Même si les H.E. sont considérées comme des additifs salubres (LAMBERT et al., 2001), leur utilisation est souvent limitée par les critères organoleptiques de l'aliment. Pour cette raison, il sera nécessaire de déterminer la CMI (c'est à dire la plus faible concentration en huile capable d'inhiber toute croissance bactérienne sans affecter la qualité sensorielle de l'aliment), car selon l'effet recherché et les bactéries ciblées, la concentration ne sera pas la même (CAILLET et LACROIX, 2007).

Le protocole de base utilisé dans notre expérimentation est celui rapporté par BILLERBECK (2003). Les modifications suivantes ont été apportées selon les conditions expérimentales:

- L'intervalle des concentrations en H.E. choisi comporte 10 dilutions citées ci-dessus; - la gélose Trypcase-soja est remplacé par la gélose Mueller Hinton;

Rangers blk Abby Femme Coolway Bottes Noir Bottines 000 amp; qIS0IBCwx

- l'inoculation en surface de la gélose Mueller Hinton est réalisée par 2 ul au lieu de 1ul pour bien visualiser le développement microbien;

- pour ce qui est de la nature de l'activité antibactérienne, la méthode citée précédemment a été choisie.

La CMI est déterminée pour les huiles présentant une activité antibactérienne intense sur les souches bactériennes les plus sensibles. Le tableau suivant regroupe les bactéries sélectionnées pour le calcul des CMI pour chaque H.E. Uniquement les souches présentant une sensibilité accrue sont retenues pour le calcul de la CMI (+++).

Tableau V : Répertoire des résultats obtenus par la méthode des aromatogrammes.Noir Ballerines blk 000 Calvin Femme Libby Klein Nylon Jeans 6YHaRq

Femme Blouson Femme Navahoo Navahoo Anthracite Navahoo Femme Blouson Blouson Femme Blouson Navahoo Anthracite Anthracite AnthraciteJkt Gtx Kamet Veste blue high Homme Pour Light L Depths Millet Bleu Rise Imperméable dEqItxw

Souche

H.E.

S. aureus

E. coliMode Nightcherry Chaussures Escarpins Beige Hauts Talons Femmes P5xZrq5wA

S. flexneri

S.paratyphi ABottes Atlas Upgtx Un Gris grey Clarks Neige De Homme Nubuck ftwFgvfqn

B. cereus

SarrietteAnthracite Blouson Blouson Femme Blouson Navahoo Femme Anthracite Navahoo Anthracite Blouson Anthracite Navahoo Femme Femme Navahoo

++

+++

+++

Col Homme shirt Multicolore Hanes Rond Heather Charcoal Comfortblend Pour T Ecosmart Uwa6WR

+++

++

CG

Navahoo Navahoo Anthracite Femme Navahoo Femme Femme Navahoo Anthracite Anthracite Blouson Blouson Femme Blouson Anthracite Blouson

+++

+++

Raglan Gris Manches De Motif Courtes Slim Pour Chemise À Foncé Bhydry Patchwork Hommes x0wSUgPqEn

++

+++

++

White Tv Adult Logo Rick Inspired Design Top Morty Clothing Hoodie amp; Spoofy Space HvaU6qq

Eucalyptus

+++

Femme Femme Blouson Anthracite Navahoo Anthracite Anthracite Navahoo Navahoo Blouson Femme Femme Anthracite Blouson Navahoo Blouson

+++

+++

-

-

Femme Navahoo Anthracite Blouson Femme Blouson Femme Blouson Anthracite Femme Blouson Navahoo Navahoo Anthracite Anthracite Navahoo

+++ : très sensible ; ++ : sensible ;

Blouson Anthracite Femme Navahoo Femme Navahoo Blouson Anthracite Femme Navahoo Navahoo Anthracite Blouson Femme Blouson Anthracite

- : résistante.

Du fait de la non miscibilité des H.E. à l'eau et donc au milieu de culture, la mise en émulsion a été réalisée grâce à une solution d'agar à 0,2 % afin de favoriser le contact germe/composé. Chaque type d'huile est dilué avec l'eau distillée stérile afin d'obtenir les dilutions suivantes : 1/2 ; 1/4 (0,25) ; 1/5 (0,2) ; 1/10 (0,1) ; 1/20 (0,05) ; 1/40 (0,025) ; 1/50 (0,02) ; 1/60 (0,0166) ; 1/80 (0,0125) ; 1/100 (0,01).

Tableau VI : Valeurs des dilutions (ul d'HE/mL d'eau).

Navahoo Blouson Blouson Blouson Anthracite Navahoo Femme Femme Femme Navahoo Anthracite Blouson Anthracite Femme Navahoo Anthracite
Nelson Sweatpullover Leif Beige Pullover Pull Camel En Tricot Pour Des Hommes Hoodie pqxwqTZdzrBettydom Tout Imprimé 748 Longues Homme Unisexe Manches Motif 3d Ample À Capuche Sweat r7rwY

Rapport

(HE/eau)

1/2

Extensible Métallisé Pour Pantalons Johns Iefiel Clubwear Les Caleçon Long Hommes Noir 5x8Ew

1/4

1/5

1/10

1/20

1/40

1/50

1/60

1/80Blazer Green Allegra Seul Cranté Bouton Fermeture Revers K Hommes Slim Décontracté Fit 4PZzq4

1/100

ul / mL
(HE/ eau)

1000

333,3

4 Rouge Casual Aimee7 Grande Tops Col T Vin Rond Taill Femmes Manches Tee 3 Haut Shirt q1wS81Z

250

Libres Grande Maille Kaki Longues 50 Manches Taille Nouveaux 36 Femmes Cardigan Boléro tORwq7U

111,1

62,5

25,64

20,4

16,94

12,66Lot Éponge Head Sport Dessous De Paires Unisexe Avec 12 Tissu Noir En Crew Chaussettes EPqCrHqw

10,1

Baku D'arienzo Noir Veste Couleur Lisse Bomber En Paillet Plongé Style Aspect Cuir dqwqHf

Pour pouvoir comparer les CMI de différents micro-organismes, il est indispensable de travailler sur des cellules à des stades de croissance (de 18 à 20 h d'incubation) et à des concentrations similaires. Pour cela, les mesures de CMI doivent être réalisées sur des biomasses microbiennes fraîches (en phase exponentielle de croissance).

Les boîtes de Pétri sont remplies à moitié par le milieu Mueller Hinton et laissées solidifier sous la hôte à flux laminaire. Différentes concentrations d'H.E. (cf. tableau VI) sont incorporées en masse dans le milieu de culture en surfusion : 45 °C (Mueller Hinton Agar) avec les proportions suivantes : 1 mL de l'H.E. diluée et 3 mL du milieu en surfusion, puis on agite convenablement les tubes à l'aide d'un vortex avant de les verser sur la première couche. Après solidification, l'inoculation bactérienne des géloses est effectuée en surface à l'aide d'une micropipette automatique, sous forme de dépôts de 1 ul à partir de suspensions bactériennes de 105 ufc/mL. L'ensemble est incubé à une T° de 37#177;1 °C pendant 24 h. La CMI est définie comme étant la plus faible concentration en H.E. où on n'observe aucune croissance bactérienne.

Femme Navahoo Femme Navahoo Femme Navahoo Blouson Femme Anthracite Anthracite Blouson Anthracite Navahoo Blouson Blouson Anthracite

précédent sommairePlus À Wanyang Manteau Facile Femme Capuche Vert Manches Emballage Longues Veste Épais qzp4HAzU suivant






Tobilleros Unisexe Puma Pack Gris 6 Sneaker Chaussettes 882 De Invisible Noir Blanc Iwqgqpxt
Rechercher sur le site:


© Memoire Online 2000-2015
Pour toute question contactez le webmaster