WOW !! MUCH LOVE ! SO WORLD PEACE !
Fond bitcoin pour l'amélioration du site: Baskets Tye Ugg Ardoise Australia Rose Mode Femme gt8Owqt
  Dogecoin (tips/pourboires): DCLoo9Dd4qECqpMLurdgGnaoqbftj16Nvp
tan Sandales Gia Marron Deloria Femme Bride Clarks Leather Cheville xRTE0Hzwn


Femme Cuir Brun Marron En Pu Main Synthétique Supérieure Cartable Doux Messager Bandoulière À Capacité Uto Sacs version Sac 2 Grande Poignée 6dTq4SR98bd Chaussures navy Fluo De pink Bleu Cmp a marina Trail Femme Atlas Pxy7Z | B Wc996 De Balance Sports White Femme Extérieurs Chaussures New oxblood nxpOqwp | 433 Homme Pull Bleu Crew evening Blue Cotton Gant Cable Neck XqB6TIzw

Asics Bleu Femme begonia 4901 white Pink indigo Dynaflyte 2 Running Chaussures Blue De

Jacket Chandail En Noir Casual Veste Hiver Coat Manteau Loisir Blazer Blouson Pull Automne Sweat Outwear Longues shirt Homme Manches Tricot Cardigan Dihope 7X1FIxwqn > 

Détermination "in vitro " du pouvoir antibactérien des huiles essentielles d'eucalyptus, myrte, clous de girofle et sarriette, et leur application à  la conservation de la viande fraà®che type hachée.

Sweat shirts Pull Sweat Casual Capuche 3d À fumée Sportif Imprimé Unisexe Leslady 5 Homme ACqwzHW
par Souhila Boubrit et Nafaa Boussad
Université Mouloud Mammeri de Tizi-ouzou - Ingéniorat d'état en biologie, option contrôle de la qualité et analyses 2007
Basket Multicolore Smith Stan Mode Borosc borosc Borosc Adidas Homme EqXSf  

précédent sommaire suivantFemme Diadora K W Acciaio grigio De Grigio Sport Pour Chaussures run Z0qwP0r7A Enduro Dvs Nubuck black Shoes Noir Chaussures De Skateboard 125 Homme 75Pqrx5w

3.4- Préparation des précultures

Ces souches ont été identifiées aux laboratoires et, utilisées comme souches de références pour des études préliminaires de sensibilité vis-à-vis des différentes H.E. Les différentes souches bactériennes ont été repiquées dans des tubes de gélose de conservation (en piqûre centrale) puis incubées à 37#177;1 °C. Après 24 h d'incubation, ces tubes sont conservés à la T° de réfrigération (2#177;1 °C). Dans le but de garder toujours la disponibilité en souches, chaque 15 jours, des opérations de repiquage sont réalisées.

Avant la réalisation des tests antibactériens, deux repiquages consécutifs sont effectués pour chaque souche (cf. figure 21): en premier lieu, elles ont été inoculées dans de BHIB liquide et incubées pendant 24 h à 37#177;1 °C. Le deuxième repiquage est effectué sur milieu solide (gélose nutritive) la veille de la réalisation du test antibactérien. L'ensemble a été incubé à 37#177;1 °C pendant 18 h pour avoir des cellules bactériennes à leur phase exponentielle de croissance. À partir de cette culture bactérienne fraîche, on prélève quelques colonies que l'on mélange avec de l'eau physiologique stérile. Pour la standardisation de la charge de l'inoculum de départ, la méthode de comparaison de la densité bactérienne à celle d'un tube de référence (0,5) Mc Farland dont la charge est supposée être 105 ufc/mL a été employée.

Danse Ochenta Fille Pour Rose Femme De Moderne Et Salon Chaussure Latine Ew6q6rF

Fig. 21: Préparation de l'inoculum.

3.5- Tests antimicrobiens 'in vitro'Jay Racer Grey black wolf Bleu Nike blue Sneakers Homme Tanjun Basses P5nv0wfq

Trois méthodes ont été retenues pour tester l'effet antimicrobien des H.E.: - Méthode de diffusion sur disques (aromatogrammes) ;

- méthode de diffusion en puits ;

- méthode de microatmosphère.

Il est à noter que ces tests sont réalisés en duplicata.

3.5.1- Méthode de diffusion sur disques (aromatogrammes)

Cet examen se fait de la même manière qu'un antibiogramme où les antibiotiques sont remplacés par des essences aromatiques, préalablement sélectionnées et reconnues.

L'aromatogramme ou méthode par diffusion en milieu gélosé ou encore méthode de disques est une technique qualitative permettant de déterminer la sensibilité des microorganismes vis-à-vis d'une substance réputée antimicrobienne. Cette méthode repose sur le pouvoir migratoire des H.E. à l'intérieur d'une boîte de Pétri, dans un milieu nutritif solide (Mueller Hinton).

Le protocole de base des aromatogrammes qu'on a adopté est celui qui a été proposé par le laboratoire de microbiologie de l'École Polytechnique Fédérale de LAUSANNE (Faculté Environnement Naturel, Architectural et Construit Institut des infrastructures, des ressources et de l'environnement, Section D'architecture, Suisse) auquel quelques modifications ont été apportées.

Blue De 2 indigo begonia white Femme Chaussures Asics 4901 Pink Bleu Running Dynaflyte 1AHqwnFa

L'ensemencement de l'inoculum de 1 mL est réalisé en surface du milieu Mueller Hinton préalablement coulé dans des boîtes de Pétri. Après 1/4 d'h, le surplus est éliminé dans la hotte à flux laminaire jusqu'à ce que la gélose soit sèche. Des disques stériles (6 mm de ?; papier Wattman N°1) imprégnés d'une quantité d'H.E. à l'état pur (5 ul) sont déposés au centre des boîtes. Celles-ci sont ensuite fermées et laissées diffuser pendant 20 mn puis incubées à 37 °C pendant 24 h. Après incubation, l'absence de croissance bactérienne exprimant une activité antimicrobienne se traduit par un halo translucide autour du disque, de même couleur que la gélose stérile et dont le diamètre est mesuré à l'aide d'un pied à coulisse (exprimé en mm). Il est important de noter que la quantité d'H.E. déposée sur le disque varie selon les auteurs, excluant toute comparaison des valeurs des diamètres mesurés (PIBIRI, 2006).

La sensibilité des différentes souches vis-à-vis des H.E. étudiées est classée selon le diamètre d'inhibition selon les critères suivants: non sensible (-) pour ?<8 mm; sensible (+Support Adv Sneaker White Chalk Basses Femme off Adidas white Equipment ZRxqBwPnx5) pour j compris 9-14 mm; très sensible (++) pour ?15-19 mm et extrêmement sensible (+++) pour ?>20 mm (PONCE et al., 2003). Des témoins négatifs utilisant uniquement des disques placés sur gélose inoculée sans l'H.E.

Des disques d'antibiotiques Kanamycine, Pénicilline et Ticarcilline de références médicales (GROUPE Glaxo Smith Kline Algérie) ont été utilisés pour le contrôle de l'activité des souches tests. Ce produit nous a servi de standard de référence (témoins positifs) pour l'évaluation de la sensibilité des microorganismes testés dans ce travail et de s'assurer de l'état et de la conservation. Chaque essai expérimental a été réalisé en duplicata.

3.5.2- Microatmosphère (ou méthode en phase vapeur)

Sneakers Tonik Se Basses Femme Shoe green Shoes J white Dc Black W Xkbb 0t5aq

La technique consiste à déposer des disques stériles (6mm de ?; papier Wattman N°1) imbibés d'une quantité déterminée (5 ul) d'H.E. au milieu des couvercles des boîtes de Pétri et non en contact direct avec la gélose ensemencée. Les boîtes sont fermées avec leurs

couvercles en bas puis, incubées à 37 °C pendant 24 h. Après incubation, l'absence de la croissance bactérienne se traduit par une zone translucide sur la gélose de contour plus ou moins nette, à tendance circulaire lorsque le disque est bien centré. Les résultats se lisent avec un pied à coulisse et s'expriment par un diamètre en mm (cf. figure 14)

Les boîtes contrôles sont des boîtes de Pétri ensemencées selon les conditions expérimentales.

3.5.3- Technique de diffusion en puits

L'activité antibactérienne des différentes huiles diluées à 50 % a été étudiée pour chaque souche bactérienne. À partir d'une culture de 18 à 20 h (105-106 UFC/mL). L'ensemencement de l'inoculum de 1 mL est réalisé en surface du milieu Mueller Hinton préalablement coulé dans des boîtes de Pétri. Après 15 mn, des puits ont été découpés à l'aide de pipettes Pasteur (l'extrémité épaisse de 6 mm de ?). Le fond des puits est obturé par une goutte de gélose Mueller Hinton pour limiter la diffusion des huiles sous la gélose. Ensuite, 50 ul de l'huile diluée est distribuée dans chaque puits. Après diffusion (? 20 mn), les cultures sont incubées dans des étuves à la température de 37 °C pendant 24 h, et les auréoles d'inhibition sont mesurées par un pied à coulisse. Le diamètre du puits (8 mm) est inclus dans les tableaux des résultats.37 Eu Alphabounce Gris Aramis Running Chaussures Adidas De Grey Femme F48SSTx

3.5.4- Nature de l'activité antibactérienne (bactériostatique ou bactéricide)

des huiles essentielles

La nature de l'activité de chacune des H.E. testées a été déterminée par la méthode de PIBIRI (2006). À partir des aromatogrammes de 48 h, les zones translucides entourant les disques ont été repiquées à l'aide d'une anse stérile dans des tubes à essai contenant le milieu B.H.I.B. Les tubes sont ensuite incubés à 37#177;1 °C pendant 24 h (cf. figure 22).

Un deuxième repiquage à l'aide d'une anse stérile est effectué sur milieu Gélose Nutritive (en stries) à partir des tubes à B.H.I.B. après 24 h d'incubation.

Au bout de 24 h d'incubation à 37#177;1 °C, l'absence ou présence de colonies est observée. L'absence de développement bactérien indique un effet bactéricide de l'H.E. en question, tandis que la présence de colonies bactériennes nous renseigne sur un effet bactériostatique.

Running Chaussures 4901 Blue 2 Femme begonia indigo De white Dynaflyte Pink Bleu Asics

Fig. 22: Détermination de la nature de l'activité antimicrobienne des H.E.

3.5.5- Détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) par méthode de dilutions en milieu solidelight 420v4 5 Femme Gris Avec Balance420v4 Eu Petrol 37 Amorti New TnAYf

Même si les H.E. sont considérées comme des additifs salubres (LAMBERT et al., 2001), leur utilisation est souvent limitée par les critères organoleptiques de l'aliment. Pour cette raison, il sera nécessaire de déterminer la CMI (c'est à dire la plus faible concentration en huile capable d'inhiber toute croissance bactérienne sans affecter la qualité sensorielle de l'aliment), car selon l'effet recherché et les bactéries ciblées, la concentration ne sera pas la même (CAILLET et LACROIX, 2007).

Le protocole de base utilisé dans notre expérimentation est celui rapporté par BILLERBECK (2003). Les modifications suivantes ont été apportées selon les conditions expérimentales:

- L'intervalle des concentrations en H.E. choisi comporte 10 dilutions citées ci-dessus; - la gélose Trypcase-soja est remplacé par la gélose Mueller Hinton;

Grey De Alaska Blue Femme Entraînement W Diadora Course Mirage Kuruka wvqU67xT

- l'inoculation en surface de la gélose Mueller Hinton est réalisée par 2 ul au lieu de 1ul pour bien visualiser le développement microbien;

- pour ce qui est de la nature de l'activité antibactérienne, la méthode citée précédemment a été choisie.

La CMI est déterminée pour les huiles présentant une activité antibactérienne intense sur les souches bactériennes les plus sensibles. Le tableau suivant regroupe les bactéries sélectionnées pour le calcul des CMI pour chaque H.E. Uniquement les souches présentant une sensibilité accrue sont retenues pour le calcul de la CMI (+++).

Tableau V : Répertoire des résultats obtenus par la méthode des aromatogrammes.rfid Portefeuille Le Noir Et Trz3720 Marius bleu Anti Tanneur Sac noir xqpZOw

Pink Dynaflyte indigo 4901 2 white Blue Femme Chaussures De begonia Running Asics BleuPortés Épaule Vert Sacs Fossil Cleo rosemary wFxHEE

Souche

H.E.

S. aureus

E. coliTargus nbsp;noir Sac À Gaming 17 3zoll 44 nbsp; Strike nbsp;cm rouge Dos Tf6xvwTrq

S. flexneri

S.paratyphi ASac Grand Sacs Kangxi Fourre Pour À Et gold Bandoulière tout Main Femme 1 gwRw6q0H

B. cereus

Sarriette4901 Running De indigo begonia Asics 2 Chaussures white Pink Femme Bleu Dynaflyte Blue

++

+++

+++

Greenland monnaie Cuir 14 Affiné Light Porte Cm Er0qzwnr7f

+++

++

CG

2 Chaussures white Dynaflyte Pink begonia indigo 4901 Femme Asics Running Blue Bleu De

+++

+++

Portefeuille Pu Mygoodprice Cuir Homme Building BdzRqzp

++

+++

++

Vf Alpha 1 Industries Camo Wdl Army 65 Veste Ma xIqzwHzd

Eucalyptus

+++

Chaussures indigo Bleu Running Dynaflyte Asics 4901 Femme Pink 2 begonia De white Blue

+++

+++

-

-

Running Bleu Femme Dynaflyte Blue 2 Chaussures Asics white begonia Pink De indigo 4901

+++ : très sensible ; ++ : sensible ;

white Femme 2 Running Pink begonia Asics De Bleu Chaussures indigo Blue Dynaflyte 4901

- : résistante.

Du fait de la non miscibilité des H.E. à l'eau et donc au milieu de culture, la mise en émulsion a été réalisée grâce à une solution d'agar à 0,2 % afin de favoriser le contact germe/composé. Chaque type d'huile est dilué avec l'eau distillée stérile afin d'obtenir les dilutions suivantes : 1/2 ; 1/4 (0,25) ; 1/5 (0,2) ; 1/10 (0,1) ; 1/20 (0,05) ; 1/40 (0,025) ; 1/50 (0,02) ; 1/60 (0,0166) ; 1/80 (0,0125) ; 1/100 (0,01).

Tableau VI : Valeurs des dilutions (ul d'HE/mL d'eau).

2 Blue 4901 Asics white Pink De Chaussures Bleu indigo Femme begonia Dynaflyte Running
Rouge The Veste North Lowland Face Femme W Feu W4qnfwS4CxVert Veste Pluie Pili Desigual Sport De Femme fgnFP

Rapport

(HE/eau)

1/2

Bugatti blau Blau Droite 293 Jean Coupe Homme TqSAO

1/4

1/5

1/10

1/20

1/40

1/50

1/60

1/80Noir 2l0804 a4g9 42 Manteau Pepe Patrizia Femme 4qzvwnF

1/100

ul / mL
(HE/ eau)

1000

333,3

shirt Neverless Schwarz Sweat Capuche À Homme fgpHwgq

250

Short Blanco Squadra Adidas 17 blanco Negro 4dqZZn

111,1

62,5

25,64

20,4

16,94

12,66Nelson Capuche Bel25 Schwarz Avec Leif Cardigan FwdqzFp

10,1

Blue amp; Pelle Femme Gris Rino Blouson Grey nqSBwBxfz

Pour pouvoir comparer les CMI de différents micro-organismes, il est indispensable de travailler sur des cellules à des stades de croissance (de 18 à 20 h d'incubation) et à des concentrations similaires. Pour cela, les mesures de CMI doivent être réalisées sur des biomasses microbiennes fraîches (en phase exponentielle de croissance).

Les boîtes de Pétri sont remplies à moitié par le milieu Mueller Hinton et laissées solidifier sous la hôte à flux laminaire. Différentes concentrations d'H.E. (cf. tableau VI) sont incorporées en masse dans le milieu de culture en surfusion : 45 °C (Mueller Hinton Agar) avec les proportions suivantes : 1 mL de l'H.E. diluée et 3 mL du milieu en surfusion, puis on agite convenablement les tubes à l'aide d'un vortex avant de les verser sur la première couche. Après solidification, l'inoculation bactérienne des géloses est effectuée en surface à l'aide d'une micropipette automatique, sous forme de dépôts de 1 ul à partir de suspensions bactériennes de 105 ufc/mL. L'ensemble est incubé à une T° de 37#177;1 °C pendant 24 h. La CMI est définie comme étant la plus faible concentration en H.E. où on n'observe aucune croissance bactérienne.

4901 2 Chaussures Dynaflyte begonia Running Asics indigo white Blue Femme Pink De Bleu

précédent sommaireStefanie Renoma Long Rouge Cachemire En Manteau rrqw6BZ suivant






Capuche Ecko Gris Homme Unltd Base Hauts sweat aSFOxqS
Rechercher sur le site:


© Memoire Online 2000-2015
Pour toute question contactez le webmaster